趣云汇双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!

双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!

蛋白质的肽键与双缩尿类似,可与铜离子在碱性环境下(双缩尿试剂)生成紫色络合物.稀氢氧化铜溶液(斐林试剂)有弱氧化性可与还原性糖中的醛基发生反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。

双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。

双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理?!

扩展资料

双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小。且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1~10mg蛋白质,适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定,能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。

双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大。干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

参考资料来源:百度百科-双缩脲试剂

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